Text
Strategi kloning dan ekspresi gen var2csa pada sistem escherichia coli sebagai langkah pendahuluan untuk ekspresi gen pada sistem eukariot tanaman.
Penelitian ini bertujuan mengetahui apakah strategi yang digunak an dapat berhasil mengkloning dan mengekspresikan sekuen DN A target (daerah DBL3x gen var2csa) pada inang E.coli. Strategi klo ning dilakukan melalui tahapan : perbanyakan sekuen DNA target melalui teknik PCR menggunakan primer yang di desain sendiri, p eligasian sekuen DNA target pada vektor kloning pCR2.1-TOPO, d an memperbanyaknya pada inang e.coliTOP10. Strategi ekspresi d ilakukan melalui tahapan : perbanyakan sekuen DNA target melal ui teknik PCR menggunakan primer yang mengandung situs peng enalan enzim restriksi endonuklease tipe II: NcoI dan XhoI, pemot ongan dengan enzim NcoI dan XhoI, peligasian pada vektor ekspr esi pET-28a (+), dan pengekspresian pada inang E. coli BL21(DE3) dengan induser isopropyl-1-thio-b-d-galactoside (IPTG) 1mM. Stra tegi kloning berhasil mendapatkan sekuen daerah DBL3x gen var 2csa berukuran 948 pb. Strategi ekspresi berhasil mendapatkan p rotein DBL3x berukuran 38 kDa.
Tidak ada salinan data
Tidak tersedia versi lain